مقایسه نتایج دو روش ایمونوهیستوشیمی و Real-Time PCR در ارزیابی ژن HER-2 در بافت سرطانی پستان

  سابقه و هدف: HER-2/neu یکی از نشانگرهای پیش آگهی مولکولی عمده در سرطان پستان بوده و با توجه به دستورالعمل ‌ های تصمیم ‌ گیری درمان، تکثیر این ژن در روند درمان بیماران مبتلا به سرطان پستان بسیار مهم می ‌ باشد. رایج ‌ ترین روش استفاده شده برای تشخیص تکثیر ژن HER-2/neu ایمونوهیستوشیمی (IHC) است. نتایج غیرقابل سنجش، عدم تکرارپذیری و زمان طولانی از اشکالات عمده این روش بوده که محققان را بر آن داشته تا در جهت یافتن روش جایگزین مدرن بر اساس تکنیک ‌ های مولکولی مانند روش PCR Real-Time تلاش کنند. هدف از این مطالعه مقایسه تکثیر ژن HER-2/neu توسط دو روش PCR Real-Time و IHC بود.   مواد و روش ‌ ها: تعداد 41 نمونه بافت پارافینه با نتایج IHC مشخص، با روش Real-Time PCR مورد بررسی قرار گرفته و تعداد کپی ژن HER-2 در آنها اندازه گیری شد و با نتایج IHC مقایسه شد. در مواردی که نتیجه IHC دو مثبت گزارش شده بود، نمونه مربوطه با تست FISH ارزیابی گردید. ضریب Phi Cramer’s V و آزمون Fisher’s Exact برای آنالیز ‌ های آماری مورد استفاده قرار گرفت.   یافته ‌ ها: در مجموع نتایج حاصل از Real-Time PCR نشان داد که 39 % نمونه ‌ ها دارای بیان بالا (مثبت) بودند و همچنین36 % نمونه ‌ ها نیز IHC مثبت گزارش شده بودند. انطباق بین دو روش مذکور در نمونه ‌ های مثبت و منفی به ترتیب 85 و 87 درصد بدست آمد. نمونه ‌ هایی که دارای نتیجه IHC دو مثبت بودند نیز توسط تکنیک FISH مورد ارزیابی قرار گرفته و تمام آنها منفی گزارش شدند که با نتایج Real-Time PCR مطابقت داشت.   نتیجه ‌ گیری: نتایج به دست آمده نشان می ‌ دهد که هم خوانی در حدود 71 % بین نتایج دو روش Real-Time PCR و IHC وجود دارد. همچنین در مواردی که نتیجه IHC دو مثبت گزارش شده بودند، نتایج Real-Time PCR با FISH هم خوانی داشت. تکنیک Real-Time PCR میزان HER2 در بافتها را با دقت بالایی اندازه گیری کرده و با نتایج IHC نیز هم خوانی داشت. بنابراین می ‌ توان از Real-Time PCR به خاطر دقت بالا و نیز ارزانتر و در دسترس ‌ تر بودن به جای دو روش دیگر برای ارزیابی این نشانگر استفاده کرد.